实验方法:选取2个不同浓度的样本,其中一个样本被测浓度水平在医学决定水平左右或参考区间左右,每天测定1次,每次重复测定4次,连续测定5天,分别计算总均值、批内标准差及实验室内标准差(中间);根据厂家要求的标准差、有效自由度及C值计算得到验证值(V),如测量的批内标准差、实验室内标准差(中间)小于或等于验证值,则验证合格。
实验前需如实填写试剂厂家、仪器、记录编号、项目名称、校准平名称、实验时间、试剂批号、校准品批号、实验人员等信息。
在表格中填写每天检测获得的结果,并保留原始数据,如果是用热敏纸打印的实验结果,需额外进行拍照留存。
通过前5天的实验数据,分别计算每天的批均值,批标准差,方差,总均值,批内方差(Vr),批间方差(Vb),批内标准差(Sr),实验室内标准差(Sl),批内变异系数(CV),实验室变异系数(CV),自由度T值,5%假失控率X2分布的选择百分点(C值)。
计算公式(以excel计算公式为例):
批均值=AVERAGE(第n天的重复1,2,3,4)
批标准差=STDEV(第n天的重复1,2,3,4)
方差=批标准差^2
总均值=AVERAGE(各天的批均值)
批内方差(Vr)=AVERAGE(各天的方差)
批间方差(Vb)=STDEV(各天的批均值)^2
批内标准差(Sr)=SQRT(批内方差)
实验室内标准差(Sl)=SQRT(((重复次数-1)/重复次数)*批内方差+批间方差)
批内变异系数(CV)=批内标准差/总均值*100%
实验室变异系数(CV)=实验室内标准差/总均值*100%
自由度T值=((重复次数-1)*SQRT(批内方差)^2+重复次数*STDEV(各天的批均值)^2)^2/(((重复次数-1)/天数)*SQRT(批内方差)^4+重复次数^2*STDEV(各天的批均值)^4/(天数-1))
5%假失控率X2分布的选择百分点(C值)=VLOOKUP(INT(自由度T值),’5%假失控率X2分布的选择百分点’!自由度T:2水平,2,0)
- 自由度T和2水平需替换成相应的列。比如(B:C)
- 详情参考VLOOKUP函数使用规则
自由度T | 2水平 |
3 | 9.35 |
4 | 11.14 |
5 | 12.83 |
6 | 14.45 |
7 | 16.01 |
8 | 17.53 |
9 | 19.02 |
10 | 20.48 |
11 | 21.02 |
12 | 23.34 |
13 | 24.74 |
14 | 26.12 |
15 | 27.49 |
16 | 28.85 |
17 | 30.19 |
18 | 31.53 |
19 | 32.85 |
20 | 34.17 |
21 | 35.48 |
22 | 36.78 |
23 | 38.08 |
24 | 39.36 |
25 | 40.65 |
根据试剂厂家的实际说明说,找到批内和批间厂家要求的CV值,计算规定标准差(si)和验证值(V)。
规定标准差(si)=厂家要求CV%*总均值
验证值(V)=规定标准差(si)*SQRT(5%假失控率X2分布的选择百分点(C值))/SQRT(自由度T值)
如果批内标准差(Sr)≤验证值(V),则精密度验证为合格,反之为不合格。
小tips
1.本次实验需要在五天内不间断的完成,如果所在公司遵循955制度,最好在周一开始做,周五完成,不耽误双休。
2.如果对自己的数据没有较大的把握,可以在上级领导知情且同意的情况下适当增加每日的重复次数。
3.一定要保留原始数据,切记不要篡改,不要篡改,不要篡改!
4.如果试剂厂家工程师提供线下性能验证服务,只需记录数据即可。
5.机器参数一定要输入正确,最好可以看到校准的线性图。
6.试剂不足时一定要使用相同批号的试剂。
7.每个项目最好由同一个人完成。
8.配备UPS的仪器确保UPS正常工作。
祝大家精密度验证实验一次通过!